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綠色熒光蛋白的激發(fā)觀察的幾種方法

更新時間:2023-04-06   點擊次數(shù):2756次

1. 便攜式紫外光源

采用LUYOR-3410UV便攜式紫外光源(又叫高強度紫外線燈、黑光燈)觀察也非常方便,但如果觀察植物,植物葉片的葉綠色在紫外線燈下也會發(fā)出熒光,對gfp發(fā)出的熒光也會產生干擾,另外,標本長時間在紫外光源照射下對GFP標本組織也會造成破壞。

上圖:熒光蛋白激發(fā)觀測燈照射煙草葉片,GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達

2. 便攜式GFP激發(fā)光源

采用LUYOR-3415RG便攜式GFP激發(fā)光源(又叫熒光蛋白觀測鏡、熒光蛋白激發(fā)觀測燈)是便捷、方便的觀察方法,因GFP在470nm有一個很高的吸收峰,采用 470nm激發(fā)光源能夠激發(fā)GFP發(fā)出明亮的綠色熒光,在觀察gfp熒光時,因為激發(fā)光為強烈的藍色光線,佩戴專業(yè)的觀察眼鏡才能觀察到清晰的熒光信號。

3、熒光顯微鏡

熒光顯微鏡: 熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。目前在常用的方法就是采用熒光顯微鏡觀察,熒光顯微鏡在實驗室普及。

但熒光顯微鏡的缺點是需要取樣才能觀察,如果樣本過大,無法放置在熒光顯微鏡上面,需要破壞樣本進行取樣。 觀察植物葉片需要摘取葉片才能觀察。有時候觀察組培苗,組培苗在組培瓶里面無法取出,就無法在熒光顯微鏡下觀察,熒光顯微鏡在觀察熒光時候還是有很多的局限性。

總之,如果要激發(fā)熒光蛋白的熒光,觀測熒光蛋白的表達效果,LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測燈是相對理想的觀測工具,LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測燈檢測轉綠色熒光蛋白(GFP)基因、紅色熒光蛋白(DsRed);檢測基因植物:水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥;檢測轉GFP、DsRed基因動物:小鼠、兔子、猴子等;檢測轉GFP、DsRed基因微生物:細菌、真菌、酵母等檢測GFP、DsRed基因組織特異性表達。上海峰 志儀器為美國路陽授權代理商,現(xiàn)貨供應美國路陽的LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)觀測燈。

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GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達


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